Сифилис. Частная микробиология. Бледная трепонема (Treponema pallidum) — возбудитель сифилиса: микробиология, антигенные свойства, иммунитет, общая информация о диагностике сифилиса Морфология и физиология бледной трепонемы

Сифилис. Частная микробиология. Бледная трепонема (Treponema pallidum) — возбудитель сифилиса: микробиология, антигенные свойства, иммунитет, общая информация о диагностике сифилиса Морфология и физиология бледной трепонемы

Глава 37. Возбудитель сифилиса

Treponema pallidum – возбудитель сифилиса включен в род Treponema (от лат. trepo – поворачивать, nemo – нить).

Т. pallidum открыта Ф. Шаудином в 1905 г. Большой вклад в изучение сифилиса внесли И. И. Мечников, П. Эрлих, Д. К. Заболотный и др.

Морфология. Т. pallidum – спиралевидная нить размером 8-18 × 0,08-0,2 мкм с мелкими, равномерными завитками. Число завитков 12-14. Концы трепонемы заострены или закруглены. Трепонемы подвижны. Обладают четырьмя видами движения. По Романовскому – Гимзе окрашиваются в бледно-розовый цвет, поэтому они называются Т. pallidum – бледная трепонема. Плохое окрашивание объясняется малым содержанием нуклеопротеидов. Спирохеты можно выявлять в препаратах, окрашенных по Бурри, серебрением. Кроме того, их изучают в живом состоянии – в темном поле.

Возбудители сифилиса спор и капсул не имеют (см. рис. 4).

Культивирование. Бледные трепонемы очень требовательны к питательным средам. На искусственных питательных средах они растут только в присутствии кусочков мозга или почек кролика и асцитической жидкости. Растут медленно, 5-12 дней при температуре 35-36° С в анаэробных условиях. Бледные трепонемы хорошо размножаются в курином эмбрионе (поперечным делением). При выращивании на искусственных питательных средах трепонемы теряют вирулентность. Такие культуры называются культуральными. Культуры, выращенные в курином эмбрионе, называют тканевыми. Они обычно сохраняют вирулентность.

Ферментативными свойствами трепонемы не обладают. Однако культуральные штаммы различаются между собой по способности образовывать индол и сероводород.

Токсинообразование. Не установлено.

Антигенная структура. Бледная трепонема содержит несколько антигенных комплексов: полисахаридный, липидный и протеиновый. Серогруппы и серовары не установлены.

Устойчивость к факторам окружающей среды. Бледные трепонемы малоустойчивы. Температура 45-55° С губит их через 15 мин. К низким температурам они устойчивы. При замораживании сохраняются до года. Спирохеты чувствительны к солям тяжелых металлов (ртути, висмута, мышьяка и др.). Обычные концентрации дезинфицирующих веществ губят их в течение нескольких минут. Они чувствительны к бензилпенициллину, бициллину и др. Под влиянием некоторых факторов внешней среды и антибактериальных препаратов трепонемы могут образовывать цисты. В такой форме они длительно находятся в организме в латентном состоянии.

Восприимчивость животных. В естественных условиях животные сифилисом не болеют. Однако на обезьянах, как показали И. И. Мечников и Э. Ру, можно воспроизвести клиническую картину сифилиса: на месте введения образуется твердый шанкр. В настоящее время показано, что при заражении кроликов, морских свинок на месте введения или в другом месте на коже образуются язвы. На кроликах путем пассажей можно длительное время сохранять выделенный штамм трепонем.

Источники инфекции. Больной человек.

Пути передачи. Контакт бытовой (прямой контакт), преимущественно половой путь. Иногда сифилис может передаваться через предметы (посуду, белье). От больной сифилисом матери заболевание передается через плаценту ребенку (врожденный сифилис).

Патогенез. Входными воротами являются слизистые оболочки половых путей и ротовой полости.

Первичный период – спирохеты попадают на слизистую оболочку, и после инкубационного периода (в среднем 3 нед) на месте внедрения образуется язва, которая характеризуется плотными краями и дном – твердый шанкр. Образованию твердого шанкра сопутствует увеличение лимфатических узлов. Первичный период продолжается 6-7 нед.

Вторичный период – возбудители сифилиса по лимфатическим и кровеносным путям распространяются по всему организму. При этом на коже и слизистых оболочках образуются розеолы, папулы, везикулы. Продолжительность этого периода – 3-4 года.

Третий период – развивается при нелеченом сифилисе. В этот период в органах, тканях, костях, сосудах образуются грануляционные разрастания – гуммы или гуммозные инфильтраты, склонные к распаду. Этот период может продолжаться несколько лет (в скрытой форме). Больной в этот период незаразен. При нелеченом сифилисе (в некоторых случаях), спустя много лет, может наступить поражение центральной нервной системы: при поражении головного мозга – прогрессивный паралич, при поражении спинного мозга – спинная сухотка. Эти заболевания возникают при локализации трепонем в мозговой ткани, что приводит к тяжелым органическим и функциональным изменениям в организме.

Иммунитет. Естественного иммунитета нет. При заболевании сифилисом развивается “нестерильный” инфекционный иммунитет. Его называют шанкерный, так как при повторном заражении твердый шанкр не образуется, но все последующие периоды развиваются. При сифилисе обнаруживают IgC и IgM, а также реагины IgE, которые в присутствии кардиолипидного антигена связывают комплемент.

Профилактика. Санитарно-просветительная работа, раннее выявление больных сифилисом. Специфическая профилактика. Не разработана.

Лечение. Пенициллин, бициллин, биохинол и др.

Контрольные вопросы

1. Опишите морфологию спирохет и методы окраски.

2. Что такое твердый шанкр?

3. Какой материал для исследования Вы будете брать в разные периоды заболевания сифилисом?

4. Каков иммунитет при сифилисе?

Микробиологическое исследование

Цель исследования: выявление бледной трепонемы и серодиагностика.

1. Содержимое твердого шанкра (первичный период).

2. Содержимое розеол, папул, везикул (вторичный период).

3. Кровь (вторичный, третий и четвертый периоды).

Способы сбора материала

2. Реакция иммунофлюоресценции (РИФ).

3. Серологический: 1) реакция Вассермана (РСК);

2) осадочные реакции.

4. Реакция иммобилизации трепонем (РИТ).

Ход исследования

Реакция Вассермана. Реакцию ставят по принципу реакции связывания комплемента (табл. 52). Отличается она тем, что при реакции Вассермана может быть использован неспецифический антиген. Например, липоидный экстракт из бычьего сердца – кардиоантиген. Ввиду неспецифичности антител, реагирующих с этим антигеном, их называют реагинами. Реакция с неспецифическим антигеном объясняется тем, что в сыворотке крови больного повышается содержание глобулинов и изменяется степень их дисперсности. Глобулины, вступая в соединение с липидными экстрактами, образуют комплекс, который связывает комплемент, и поэтому гемолиз не происходит (в гемолитической системе). Отсутствие гемолиза – положительная реакция – серологически подтверждает диагноз “сифилис”. При постановке серологических реакций нужно использовать также специфические антигены из тканевых трепонем и культуральные.

Таблица 52. Постановка реакции Вассермана

Примечание. 1) ++++ полная задержка гемолиза; – гемолиз; 2) антиген № 1 неспецифический (липоидная фракция бычьего сердца); 3) антигены № 2 и 3 специфические, приготовленные из культур трепонем.

Осадочные реакции. 1. Реакция Кана. Сыворотку больного инактивируют при 56° С 30 мин. К антигену (экстракт липидов бычьего сердца) прибавляют 0,6% холестерина для повышения чувствительности реакции (табл. 53).

Таблица 53. Схема постановки реакции Кана

Учет результата: появление преципитации отмечается как положительная реакция.

2. Реакция Закса – Витебского (цитохолевая осадочная реакция) является модификацией реакции Кана. Авторы применили более концентрированный антиген, к которому прибавлен холестерин, что способствует более быстрому образованию преципитата.

Реакция иммобилизации трепонем (РИТ). Это наиболее специфичная реакция в диагностике сифилиса.

В настоящее время разработана методика этой реакции: взвесь трепонем получают из измельченного яичка кролика, зараженного Т. pallidum, и сохраняют в специальной среде, не угнетающей подвижность трепонем. В пробирку вносят 1,7 мл взвеси тканевых трепонем, добавляют 0,2 мл испытуемой сыворотки, 0,1 мл свежего комплемента.

Контроли: в 1-ю пробирку вместо испытуемой сыворотки вносят сыворотку здорового лица; во 2-ю – наливают инактивированную сыворотку морской свинки. Все пробирки помещают в эксикатор или анаэростат, заполняют их смесью газов (1 объем углекислоты и 19 объемов азота) и ставят в термостат при 35° С. Затем исследуемый материал наносят на стекло и изучают подвижность трепонем в темном поле. Принцип реакции заключается в том, что сыворотка больного сифилисом в присутствии комплемента угнетает движение бледной трепонемы. Определяют процент иммобилизованных трепонем.

Результат считают положительным, если иммобилизованных трепонем выше 50%; слабоположительным – от 30-50%; отрицательным – ниже 20%.

Контрольные вопросы

1. Какой материал используют для лабораторной диагностики сифилиса в разные периоды заболевания?

2. Каковы методы лабораторного исследования при диагностике сифилиса?

3. Какими антигенами нужно пользоваться при постановке реакции Вассермана?

4. Какие ингредиенты необходимы для постановки реакции иммобилизации трепонем (РИТ)? Какой материал берут у обследуемого, что в нем определяют?

Бледная трепонема: симптомы и методы лечения

Многие люди сталкивались с заболеваниями, передающимися половым путем. На 100% от инфицирования не застрахован никто. Одной из таких болезней является сифилис. Его возбудитель — бледная трепонема. Это опасная инфекция, приводящая к тяжелым последствиям, если не избавиться от нее своевременно.

Что такое бледная трепонема

Очень важно понимать, что это такое бледная трепонема (спирохета). Патогенные спирохеты — бактерии рода Treponema. Как выглядит инфекция, можно посмотреть в интернете на тематических форумах. Строение бледной спирохеты (трепонемы): тонкий, длинный микроорганизм спиралевидной формы. Похож на штопор с завитушками 8-12 штук. Длина 8-20 мкм, ширина 0,25-0,35 мкм.

Спирохета — это микроб-возбудитель сифилиса. Его изучением занимается микробиология. Открыта трепонема в 1905 году Гофманом и Шаудином. Они первые создали общую характеристику патогенных спирохет.

Существует несколько видов болезнетворных микроорганизмов. Каждый из них имеет свои характерные особенности и морфологические отличия. Классификация спирохет:

• трепонема паллидум;
• carateum;
• pertenue;
• endemicum.

Что это такое бледная трепонема стало понятно. Необходимо разобраться с морфологией спирохет в зависимости от вида, знать какую опасность они представляют. А также как распознать инфицирование патогеном, и какие лечебные меры предпринять.

Существует несколько видов болезнетворных микроорганизмов

Таксономия трепонемы — возбудителя сифилиса:

• Трепонема паллидум. Спирохета pallidum бледная самый распространенный патогенный вид. Провоцирует возникновение сифилиса.
• Трепонема carateum вызывает патологию Пинта. Это заболевание кожных покровов. Встречается в Латинской Америке.
• Трепонема pertenue приводит к невенерическому сифилису. При патологическом состоянии затрагиваются кости, суставы, эпидермис. Инфекция наиболее распространена в тропических странах.
• Трепонема endemicum вызывает беджель. Это эндемическая форма сифилисного поражения. Существует преимущественно в Экваториальной Африке, на Ближнем Востоке.

В нашей стране встречается первая разновидность. Поэтому в дальнейшем речь пойдет о ней.

Среда и условия для обитания

В окружающую среду бактерии трепонемы (спирохеты) проникают со слюной, с семенной жидкостью, выделениями из эрозийных поражений и язв инфицированного. Сохраняются они в ней до тех пор, пока вещество, в котором патоген находится, не высохнет. От этого и зависит сколько проживет микроорганизм.

Паразитирующий микроб устойчив к высоким температурным режимам. При +52 градусах он умирает лишь через четверть часа. При более высокой температуре погибает раньше. Даже при кипячении патоген живет несколько секунд. При температуре +42 градуса болезнетворный микроорганизм становится активнее и умирает спустя время. Благодаря исследованиям было выявлено, что патоген не погибает даже в трупе трое суток.

Спокойно живет спирохета и при низких температурных режимах. При заморозке она представляет опасность еще год. Низкие температурные режимы и бескислородная среда являются лучшими условиями для синтеза патогенного микроорганизма.

Трепонема плохо переносит следующее:

• мышьяк и висмут;
• пенициллины;
• ртуть;
• влияние кислотных и щелочных веществ;
• проникновение света и ультрафиолетовых лучей;
• дезинфицирующие вещества.

Однако исследования выявили, что иногда патоген бывает устойчив к кислороду, свету, ультрафиолету, высушиванию.

Какую опасность несет

Как говорилось ранее, бледная спирохета — возбудитель сифилиса. Заболевание имеет высокий процент летальных исходов. После активации возбудителя, если инфицированный не начинает необходимое лечение, у него через несколько лет отказывают различные органы и системы.

У человека проявляются следующие патологии в результате болезни, вызванной спирохетой:

• прогрессирующий паралич;
• спинная сухотка;
• сифилитическое поражение скелета, сердца и остальных органов.

Сифилис вызывает инвалидность на всю жизнь. Нелеченная патология приводит к деформации опорно-двигательного аппарата. Это вызывает внешнее уродство.

Основным путем передачи сифилиса является половой

Источники заражения

Трепонему или спирохету бледную можно подцепить от инфицированного человека с активной формой сифилиса. Животные не являются носителями и распространителями патогенного микроорганизма.

Высоким фактором патогенности обладают инфицированные с мокрыми эрозиями, которые выделяют жидкость с большой концентрацией спирохет. Основным путем передачи при этом является половой. Заражение происходит при вагинальном, анальном, оральном сексе. Инфицирование вызывают и поцелуи, укусы.

Трепонема, являющаяся возбудителем инфекции, передается вертикальным путем. То есть от зараженной матери к будущему младенцу при внутриутробном развитии или по родовым каналам при появлении на свет. Такой путь передачи встречается крайне редко.

Трепонема проникает в организм через повреждения на эпидермисе. Причем они могут быть даже не заметны невооруженным глазом. Клинические исследования установили, что патогенный микроб способен попасть в организм даже через неповрежденные слизистые оболочки.

Медицинский персонал должен быть очень осторожен при контакте с больным. Можно заразиться при обследовании, лечении и даже через инструментарий. В бытовых условиях это может случиться через посуду, зубную щетку и т. д.

В определенных ситуациях инфицирование может произойти через грудное молоко, семенную жидкость, кровь (в том числе через менструальную), секрет цервикального канала. Содержимое новообразований (герпеса, кондилом и т. д.), у болеющих сифилисом, также может содержать спирохеты. Таким образом, высыпания являются заразными в определенных ситуациях.

Патогенный микроорганизм может проникнуть при переливании крови. Это встречается редко, но имеет место. Поэтому доноров тщательно проверяют.

Симптомы инфицирования

Первые симптомы у представителей обоих полов одинаковые. У больных воспаляются лимфатические узлы. Формируется круглая язва (шанкр), не вызывающая болезненных ощущений. Оттенок она имеет синевато-красный. Шанкр на ощупь твердый. У мужчин диагностировать новообразование проще. Оно формируется на половом члене, в паху, на бедрах, животе. Редко на губах, в ротовой полости, на руках.

Шанкр у женщин обычно образуется в шейке матки, на половых губах. Очень редко в области живота, таза. Когда новообразование возникает во внутренних половых органах, своевременно обнаружить его тяжело. Поэтому венерический недуг диагностируется только при осмотре в гинекологическом кресле.

Если язву не лечить, она проходит самостоятельно через 4-6 месяцев. Уплотнение рассасывается, следов обычно на этом месте не остается. Больной ошибочно полагает, что с ним все в порядке и не спешит с визитом к врачу. Это приводит к неблагоприятным последствиям.

Спустя неделю, после появления шанкра, на горле и в паху увеличиваются лимфатические узлы. Это является сигналом для обращения в медицинское учреждение. Формирование новообразования сопровождается следующей симптоматикой:

• гипертермия без явных на то причин;
• увеличение белых кровяных телец;
• понижение гемоглобина, возникновение анемии;
• мигрени;
• ухудшение качества сна;
• потеря аппетита;
• чрезмерная раздражительность, агрессивность;
• боли в частях опорно-двигательного аппарата;
• отечность миндалин, гениталий, гортани;
• сифилитическая сыпь по телу.

При возникновении перечисленных проявления нужно незамедлительно пройти диагностику.

Методы выявления

При обращении больного в медицинское учреждение, врач проводит визуальный осмотр и собирает анамнез патологического состояния. Микробиологическая диагностика трепонем (сифилиса) предусматривает изучение биоматериала. Он берется с язвы или лимфатических узлов в 1-ый месяц развития заболевания.

Серологические методы выявления трепонем (спирохет):

• реакция Вассермана — РСК;
• реакция быстрых плазменных реагинов;
• иммунофлюоресценция;
• гемагглютинация;
• иммобилизация бледных трепонем.

Также назначаются следующие диагностические способы:

• анализ крови по ИФА;
• если есть подозрение на сифилис, определяется количество суммарных показателей антител к патогену;
• применяется для обнаружения бледных трепонем полимеразная цепная реакция.

Только после всех проведенных диагностических мероприятий ставится диагноз и назначается терапия.

Если в крови присутствуют антитела к патогенному возбудителю сифилиса, это означает, что человек инфицирован.

Антитела к бледной трепонеме

При проникновении в организм патогенов, иммунитет начинает вырабатывать антитела к инфекции (бледной трепонеме). Это белковые соединения, обладающие высокой специфичностью к бактериям и способные их уничтожить. Если в крови присутствуют антитела к патогенному возбудителю сифилиса, это означает, что человек инфицирован.

Суммарные антитела к трепонеме паллидум бывают обнаружены следующими методами:

• трепонемный тест;
• нетрепонемный тест;
• ИФА (иммуноферментный анализ).

Сдавать анализы на возбудитель сифилиса нужно при первом подозрении на недуг и в качестве профилактики. Расшифровка определения антител к бледной трепонеме в организме:

• антитела к treponema pallidum положительный результат означает, что инфекция имеется;
• отрицательный, значит патогенов не имеется.

Расшифровка результатов ИФА:

• Выявлены только иммуноглобулины G (IgG), что это значит? Заражение было в анамнезе или произошло давно.
• Pallidum IgG IgM означает, что инфицирование произошло давно. Патогены пребывают в активности.
• Определены IgM. Заражение произошло менее полугода назад. Заболевание носит острый характер.

Если значения в норме, то все в порядке. Человек не заражен. При наличии антител необходимо начинать терапию.

Методы лечения

Лечить сифилитическое поражение начинают только после постановки диагноза и его подтверждения лабораторными анализами. Терапевтическая схема подбирается индивидуально. Лечение применяется с комплексным подходом. Его процесс контролируется лабораторными исследованиями.

Для устранения инфекции используют антибиотики пенициллинового ряда. Если на них имеется аллергия, то для предотвращения размножения и распространения инфекции применяются тетрациклины, цефалоспорины, эритромицин. При тяжелых формах недуга дополнительно выписываются йодированные препараты, висмут, иммуностимуляторы, биогенные стимуляторы. Назначаются физиотерапевтические процедуры.

Лечебные мероприятия должен пройти и половой партнер инфицированного. Иначе патоген так и будет переходить от одного человека к другому. После прекращения терапии пациент еще какое-то время стоит на учете у врача-венеролога. Это продолжается до тех пор, пока результаты диагностики не станут отрицательными.

Лечить последствия инфицирования бледной спирохетой должен только высококвалифицированный доктор. Применение нетрадиционных методик допустимо, но с разрешения врача и в качестве дополнения к консервативной терапии. Народная медицина способна только уменьшить симптоматику патологического состояния, а не уничтожить бледную трепонему.

При своевременном лечении и выполнении всех предписаний венеролога, прогноз будет благоприятным. От инфекции получится избавиться навсегда.

Видео

Анализы на бледную трепонему.

Все о бледной трепонеме

Бледная трепонема (Treponema pallidum) является возбудителем сифилиса. Это венерическое заболевание известно с древних времен, однако его возбудитель был открыт только в 1905 году австрийскими учеными Э. Гоффманом и Ф. Шаудином. Его назвали бледной (pallidum) спирохетой.

Имея очень тонкое спиралевидное тело, бледные трепонемы легко проникают через слизистые оболочки и поврежденные кожные покровы в организм человека чаще при половом контакте, в том числе в извращенной форме, значительно реже — контактным путем или непосредственно с кровью. Бледные трепонемы поражают слизистые оболочки, кожные покровы и внутренние органы. После периода размножения на месте внедрения возбудителей сифилиса образуется первичная сифилома (твердый шанкр, «твердая» язва). Течение заболевания волнообразное и поэтапное.

Специфические признаки сифилиса после манифестного течения самопроизвольно исчезают, а далее вновь появляются, меняя свою окраску. Длительность рецидивирующего течения заболевания протекает около 2-х лет и является важнейшим признаком раннего сифилиса. Сифилиды, лишенные эпителия, содержат большое количество бледных трепонем. С годами заразность больных сифилисом уменьшается.

Бледная трепонема относится к отряду Spirochaetales, семейству Spirochaetaceae, роду Treponema. Спирохеты обладают уникальным строением и морфологией. Они широко распространены в природе. Это тонкие, довольно длинные, гибкие и подвижные бактерии. Патогенными для человека являются четыре подвида Treponema pallidum:

• Treponema pallidum pallidum вызывает сифилис.
• Treponema pallidum pertenue является причиной фрамбезии (невенерический сифилис, тропическая гранулема).
• Treponema carateum вызывает заболевание пинта.
• Treponema pallidum endemicum является причиной эндемического сифилиса (невенерический сифилис детского возраста, беджел).

Заболевания, вызванные патогенными трепонемами, имеют хроническое волнообразное течение. Сифилис распространен повсеместно, а пинта, фрамбезия и беджел встречаются только в тропических странах и имеют доброкачественное течение.

Рис. 1. Вид бледной трепонемы в электронном микроскопе.

Устойчивость возбудителей во внешней среде

• Бледная трепонема устойчива к низким температурам. До одного года выдерживает замораживание. Хранятся патогенные штаммы возбудителей в бескислородной среде при низких температурах (20 — 70°С) или высушенными из замороженного состояния.
• Трепонемы сохраняют свою вирулентность на предметах окружающей среды до момента высыхания. При температуре до 42°С активность бактерий вначале повышается, а затем они погибают. При нагревании до 60°С трепонемы сохраняют свою активность в течение 15 минут. Более 3-х суток возбудители сифилиса сохраняют свои патогенные свойства в трупном материале.
• Вне организма человека бактерии быстро погибают. При температуре 100°С они погибают мгновенно. Бледные трепонемы чувствительны к дезинфицирующим средствам и некоторым антибиотикам.

Рис. 2. Для выявления бактерий применяется реакция иммунофлюоресценции.

Возбудители сифилиса в организме больного

В организме человека бледная трепонема паразитирует в тканях, а перемещается по кровяному руслу и лимфатическим сосудам. По окончании инкубационного периода в организме больного отмечаются первичные изменения в виде твердого шанкра.

В этот период бактерии находятся в очагах поражения и тканевой жидкости в спиралевидной форме, а сам больной становится распространителем инфекции. Особенно заразны больные во вторичном периоде — периоде рецидивного сифилиса. Периоды затихания заболевания связаны с тем, что большая часть трепонем находится внутриклеточно (в фагоцитах). В таком состоянии бактерии не способны размножаться и распространяться по организму.

Бледные трепонемы способны укрываться от негативного воздействия факторов окружающей среды, превращаясь в L-формы и цисты, что объясняет хроническое течение заболевания. На поздних стадиях сифилиса заразность больных минимальная. Общее количество возбудителей снижено. Реакция организма на инфекцию ослаблена.

Рис. 3. Микроскопия мазка, приготовленного методом серебрения. Возбудители сифилиса имеют темную окраску. В желтый цвет окрашены клетки инфицированных тканей.

Характеристика возбудителя: внешнее строение

Бледная трепонема по внешнему виду напоминает штопор. Она имеет 8 — 14 равной величины завитков, высота которых уменьшается на концах. Спиралевидная форма возбудителя сохраняется во всех случаях и при любых условиях. Длина микроорганизма составляет от 5 до 15 мкм, ширина — 0,2 мкм.

Рис. 4. На фото возбудитель сифилиса Treponema pallidum (вид в электронном микроскопе).

«Концевые» образования

Концы у большинства трепонем заострены. На них расположены выросты дискообразной формы (блефаропласты) с прикрепленными к ним в количестве 10 — 11 фибриллами.

Фибриллы тянуться вдоль тела трепонемы и обвивают его, обеспечивая бактерии спиралевидную форму. С каждого конца отходит по 2 самостоятельных пучка фибрилл. Они располагаются под наружной стенкой, проходя над цитоплазматической мембраной. Под цитоплазматической мембраной также обнаружены фибриллы. Они более тонкие и многочисленные. Фибриллы наружного пучка обеспечивают трепонеме движение, они в два раза толще. Они представляют собой длинные трубочки, состоящие из белка флагелина, достаточно устойчивого к воздействию ряда ферментов. Фибриллы внутреннего слоя играют роль каркаса.

На одном из концов бактерии имеется два округлых образования (губчатое тело). Оно обеспечивает активное проникновение бактерий в клетки хозяев.

Бледные трепонемы могут осуществлять поступательные (назад и вперед), вращательные, сгибательные, волнообразные (судорожные) и винтообразные движения.

Рис. 5. На фото бледная трепонема (культуральная форма).

Рис. 6. На фото бледные трепонемы с увеличением в 3000 раз (темнопольная микроскопия). Данный вид исследования позволяет регистрировать форму и движение живых бактерий.

Внутреннее строение бледных трепонем (ультраструктура)

Мукопротеидный «чехол»

Тело бактерии окружено слизевидным бесструктурным веществом (микрокапсулой). Эта мукополисахаридная субстанция защищает трепонемы от фагоцитов и антител. Капсульное вещество продуцируется самой трепонемой.

Цитоплазматическая мембрана

Цитоплазматическая мембрана бактерий выполняет ряд жизненно важных функций: транспортную, защитную, является местом локализации антигенов и ферментов, она принимает активное участие в делении клетки, L-трансформации и спорообразовании. Цитоплазматическая мембрана имеет трехслойное строение. Ее внутренний слой образует в протоплазматическом цилиндре многочисленные выросты, за счет чего осуществляется активный перенос извне питательных веществ. От состояния цитоплазматической мембраны зависит жизнедеятельность бактерий.

Протоплазматический цилиндр

Протоплазматический цилиндр находится под наружной стенкой. Структура цитоплазмы бледных трепонем мелкогранулярная. В прозрачную гиалоплазму погружены гранулы-рибосомы и множество пластинчатых структур. Рибосомы обеспечивают синтез белка в бактериальной клетке. В цитоплазме также присутствует нуклеотид, не имеющий ограничительной мембраны. Он тянется по всей длине протоплазматического цилиндра.

Мезосомы

Мезосомы являются производными цитоплазматической мембраны. Они занимают половину или целую ось поперечника трепонемы. Мезосомы снабжают энергией бактериальную клетку в точках усиленного роста при спорообразовании и делении. Их функция аналогична митохондриям. Мезосомы различаются по характеру строения, но количество их всегда очень большое.

Рис. 7. Ультраструктура бледной трепонемы. Мукопротеидный чехол сверху, далее трехслойная клеточная стенка, внутри — цитоплазматическая мембрана и цилиндр с нуклеотидом, мезосомами, рибосомами и другими включениями. На фото хорошо просматриваются фибриллы, идущие вдоль тела бактерии.

Размножение бледных трепонем

Размножение возбудителей сифилиса происходит путем поперечного деления. Деление бактериальной клетки длится около 33 часов и происходит только при температуре около 37 °C. Иногда бледные трепонемы делятся сразу на несколько частей.

Рис. 8. На фото бледные трепонемы.

Формы существования возбудителей сифилиса

В неблагоприятных условиях (воздействие антибиотиков, антител, физических и химических факторов окружающей среды, истощение питательной среды) бактерии трансформируются в L-формы, распадаются на зерна, образуют цисты и кокковые формы. В таких формах трепонемы могут длительно существовать в организме больного, а потом реверсировать, обуславливая рецидив сифилиса.

Бледные трепонемы в L-форме способны проникать в организм человека даже при отсутствии повреждений на коже и слизистых оболочках, проходят через фильтры, которые применяются при обработке кожи.

При заражении цист-формами бактерий отмечается удлинение инкубационного периода, возникновение скрытых форм заболевания и развитие устойчивости к антибактериальным препаратам.

Цисты

Неблагоприятные условия существования приводят к тому, что бледная трепонема превращается в цисту. Она сворачивается в клубок, а вокруг образуется бесструктурная прозрачная оболочка (чехол), состоящий иногда из нескольких слоев. Все морфологические элементы возбудителя при этом сохраняются. Существование цист покоя объясняет существование скрытых форм заболевания, длительное и вялое течение, устойчивость к антибактериальным препаратам. По мере давности заболевания количество цист увеличивается. Исследователями доказано, что цистообразование — это защитная реакция, обеспечивающая выживание и размножение возбудителей сифилиса.

L-формы

В L-формы трепонемы превращаются под воздействием целого ряда факторов. Трепонемы приобретают шаровидную форму, из-за блокировки синтеза истончается клеточная стенка, приостанавливается размножение, но сохраняется рост и интенсивность синтеза ДНК. В цитоплазме L-форм бактерий определяется гигантский нуклеотид, внутри которого находится большое количество нитей, содержащих ДНК.

• Спиралевидные формы бледных трепонем преобладают на ранних стадиях сифилиса. В этот период бактерии располагаются внеклеточно, интенсивно делятся, что делает их уязвимым к действию антибиотиков.
• Во вторичном периоде рецидивного сифилиса трепонемы располагаются не только внеклеточно, но и внутри фагоцитов, обнаруживается большое количество цист, более устойчивых к лечению.
• На поздних стадиях заболевания отмечается значительное снижение спиралевидных форм трепонем, увеличение числа цист и L-форм. Общее количество возбудителей снижено. Реакция организма ослаблена.

Рис. 9. Хорошо просматриваются бактерии в мазках, приготовленных методом импрегнации серебром (методика Левадити).

Бледные трепонемы под микроскопом

В цитоплазме возбудителей сифилиса находится большое количество гидрофобных компонентов, из-за чего они плохо прокрашиваются анилиновыми красителями. По методу Романовского-Гимзы бактерии окрашиваются в бледно-розовый цвет, за что получили название «бледные трепонемы».

• Хорошо просматриваются трепонемы с помощью фазово-контрастной (темнопольной) микроскопии. В свежеприготовленном мазке с живыми возбудителями в темном поле видны плавно изгибающиеся спиралевидные бактерии. От сапрофитных спирохет, которые встречаются в полости рта и на слизистых оболочках половых органов, бледные трепонемы отличаются равномерностью завитков, они более тонкие, осуществляют плавные волнообразные движения и способны сгибаться под углом.
• Хорошо просматриваются бактерии в мазках, приготовленных методом импрегнации серебром (методика Левадити). Трепонемы окрашиваются в черный цвет и хорошо видны на фоне окрашенных в желтый цвет клеток исследуемых тканей. Серебро осаждается на бактериальных клетках, увеличивая их диаметр.
• Для выявления бактерий применяется реакция иммунофлюоресценции. Бактерии в мазке, обработанные люминесцирующей сывороткой, светятся в ультрафиолетовых лучах люминесцентного микроскопа.

Рис. 10. На фото бледные трепонемы под микроскопом: импрегнация серебром (фото слева), микроскопия в темном поле (фото посередине), реакция иммунофлюоресценции (фото справа).

Культуральные свойства возбудителей сифилиса

Бледные трепонемы являются облигатными анаэробами — живут и растут в условиях отсутствия молекулярного кислорода. Бактерии практически не растут на искусственных питательных средах. Для их выращивания используются среды, содержащие лошадиную и кроличью сыворотки, на которых бледные трепонемы растут медленно и теряют вирулентные свойства. Рост происходит при температуре 35 0 С. Колонии возбудителей сифилиса появляются на 3 — 5 (на некоторых средах на 7 — 9) сутки.

Рис. 11. На фото рост колоний бледных трепонем.

Биохимические свойства бледных трепонем

Биохимические свойства возбудителей сифилиса изучены мало. Ряд штаммов продуцируют сероводород и индол. Некоторые штаммы разжижают желатин, другие — глюкозу, сахарозу, галактозу и мальтозу с образованием кислоты. Некоторые штаммы разлагают только глюкозу. Несколько штаммов возбудителей подвергают гемолизу эритроциты человека.

Рис. 12. На фото бледные трепонемы. Вид в электронном микроскопе.

Сифилис. Частная микробиология. Бледная трепонема (Treponema pallidum) — возбудитель сифилиса: микробиология, антигенные свойства, иммунитет, общая информация о диагностике сифилиса Морфология и физиология бледной трепонемы

Учебник состоит из семи частей. Часть первая – «Общая микробиология» – содержит сведения о морфологии и физиологии бактерий. Часть вторая посвящена генетике бактерий. В части третьей – «Микрофлора биосферы» – рассматривается микрофлора окружающей среды, ее роль в круговороте веществ в природе, а также микрофлора человека и ее значение. Часть четвертая – «Учение об инфекции» – посвящена патогенным свойствам микроорганизмов, их роли в инфекционном процессе, а также содержит сведения об антибиотиках и механизмах их действия. Часть пятая – «Учение об иммунитете» – содержит современные представления об иммунитете. В шестой части – «Вирусы и вызываемые ими заболевания» – представлены сведения об основных биологических свойствах вирусов и о тех заболеваниях, которые они вызывают. Часть седьмая – «Частная медицинская микробиология» – содержит сведения о морфологии, физиологии, патогенных свойствах возбудителей многих инфекционных заболеваний, а также о современных методах их диагностики, специфической профилактики и терапии.

Учебник предназначен для студентов, аспирантов и преподавателей высших медицинских учебных заведений, университетов, микробиологов всех специальностей и практических врачей.

5-е издание, исправленное и дополненное

Книга: Медицинская микробиология, иммунология и вирусология

Бледная трепонема – возбудитель сифилиса

Бледная трепонема – возбудитель сифилиса

Сифилис – циклически протекающее венерическое заболевание человека, вызываемое бледной спирохетой; I стадия проявляется твердым шанкром (фр. chancre – язва), II стадия – поражением стенки сосудов и различными сыпями, III – гуммами в различных органах с поражением нервной системы. Гумма (лат. gummi – камедь) – хронический инфильтрат в виде узла, склонный к распаду и изъязвлению. Сифилитическая гумма (син.: сифилитическая гранулема, сифилид гуммозный, сифилома третичная) – безболезненная полушаровидная гумма, являющаяся проявлением третичного активного сифилиса. Возбудитель – Treponema pallidum – был открыт в 1905 г. Ф. Шаудином и Э. Гофманом.

T. pallidum – микроорганизм спиралевидной формы, размерами 0,09 – 0,18 ? 6 – 20 мкм. Число завитков спирали от 8 до 12, завитки равномерны, расположены друг от друга на одинаковом расстоянии около 1 мкм, высота по направлению к концам уменьшается. В электронном микроскопе имеет вид змеи или дождевого червя. На обоих концах трепонемы расположены блефаропласты с прикрепленными к ним жгутиками, число которых варьирует от двух до нескольких, они образуют осевую нить, закрученную вокруг протоплазматического цилиндра спирохеты. При неблагоприятных условиях может образовывать цисты. В организме животных может возникать мукополисахаридной природы капсулоподобный чехол.

Трепонема плохо окрашивается анилиновыми красителями, в связи с чем возбудитель сифилиса и получил название бледной спирохеты. Восстанавливает нитрат серебра в металлическое серебро, которое откладывается на поверхности микроба и делает его видимым в тканях: при окраске по Морозову трепонемы выглядят коричневыми или почти черными. При окраске по Романовскому – Гимзе приобретают бледно-розовый цвет.

Трепонемы обычно размножаются поперечным делением, при этом разделившиеся клетки могут в течение некоторого времени прилегать друг к другу. Время деления – около 30 ч.

Живые трепонемы очень подвижны, совершают движения вокруг собственной продольной оси, а также сгибательное, волнообразное и поступательное движение.

До настоящего времени пока нет такого метода, при котором бы удавалось стабильно получать культуры трепонем. Патогенные для человека бледные трепонемы никогда не удавалось культивировать на искусственных питательных средах, в куриных эмбрионах или культурах клеток. Те разновидности их штаммов, которые растут в анаэробных условиях, являются, вероятно, сапрофитными спирохетами, близкими к возбудителю сифилиса. Физиология их остается мало изученной. Трепонемы относятся к хемоорганотрофам, не имеют каталазы и оксидазы, могут сбраживать углеводы. Они растут на очень богатых средах, содержащих до 11 аминокислот, витамины, соли, сывороточный альбумин. Наилучшим способом выращивания патогенных спирохет является заражение кролика в яичко (экспериментальный орхит). Высказано предположение о существовании у T. pallidum жизненного цикла, включающего, помимо спиралевидной формы, зернистую стадию и стадию кистоподобных сферических тел. Именно зернистые формы этих микроорганизмов способны проходить через бактериальные фильтры.

Антигены трепонем плохо изучены. Установлено, что в составе трепонем имеются белковые, полисахаридные и липидные комплексы. Антигенный состав культуральных и тканевых трепонем настолько близок, что антигены, приготовленные из культуральных трепонем, можно использовать для РСК при диагностике сифилиса. В организме человека трепонемы стимулируют выработку антител, которые вызывают иммобилизацию и гибель живых подвижных трепонем, связывают комплемент в присутствии суспензии T. pallidum или родственных спирохет, а также выявляются в непрямой РИФ.

Возбудитель сифилиса не образует экзотоксинов. К внешним воздействиям бледные трепонемы относительно малоустойчивы. Быстро погибают при высушивании и при повышенных температурах (при 55 °C в течение 15 мин). В 0,3 – 0,5 % растворе HCl моментально утрачивают свою подвижность; так же быстро утрачивают ее и погибают в присутствии препаратов мышьяка, висмута, ртути. В цельной крови или в сыворотке при 4 °C сохраняют жизнеспособность в течение 24 ч, что следует учитывать при переливании крови.

Эпидемиология. Сифилис – типичное венерическое заболевание. Источник инфекции – больной человек, обычно заразен в течение 3 – 5 лет; больные с поздними формами сифилиса не заразны. Заражение в подавляющем большинстве случаев происходит при различных видах половых и бытовых контактов, редко трансплацентарным путем от больной матери ребенку (врожденный сифилис) или как профессиональное заражение контактным путем у медицинского персонала. В естественных условиях сифилисом болеет только человек, в эксперименте возможно заражение обезьян, хомячков и кроликов. У обезьян в месте введения трепонем развивается твердый шанкр, у кроликов и хомячков инфекция протекает бессимптомно.

Патогенез и клиника. Инкубационный период при приобретенном сифилисе варьирует от 2 до 10 нед., обычно 20 – 28 дней. Входными воротами инфекции чаще всего являются слизистые оболочки половых органов, реже – полости рта, а также поврежденная кожа. В месте внедрения возбудитель размножается, формируется первичная сифилома (твердый шанкр) – эрозия или язва с уплотненным основанием. Далее возбудитель попадает в лимфатическую систему, развивается лимфангоит и регионарный лимфаденит. Это типичная клиника первичного сифилиса, который продолжается 1,5 – 2 мес. Потом эти признаки исчезают. Вторичный период сифилиса связан с генерализацией процесса, когда увеличиваются многие лимфатические узлы, а на коже и слизистых оболочках появляются высыпания; могут наблюдаться поражения внутренних органов и нервной системы. Различают вторичный свежий и вторичный рецидивирующий сифилис. При каждом последующем рецидиве интенсивность сыпи становится все менее выраженной, а периоды между рецидивами увеличиваются. В элементах сыпи содержится большое количество живых трепонем, в этот период больной наиболее заразен. Продолжительность вторичного сифилиса – до 4 лет и более. Далее болезнь вступает в длительный бессимптомный период, по прошествии которого, через несколько лет, развивается третичный сифилис. При этом наблюдаются грубые органические поражения внутренних органов, сердечно-сосудистой системы, ЦНС, костей, формируются гуммы, сопровождающиеся распадом ткани и дегенеративными изменениями. Характерной клинической особенностью сифилиса является отсутствие каких-либо субъективных жалоб со стороны больного (боль, зуд, жжение и т. д.).

Иммунитет. Против сифилиса ни естественного, ни искусственного иммунитета не возникает; есть только инфекционный иммунитет, и пока он существует, человек практически не восприимчив к новому заражению. Инфекционный иммунитет развивается через 10 – 11 дней после появления твердого шанкра (шанкерный иммунитет), в этот период повторное заражение или не наблюдается, или новый образовавшийся шанкр протекает абортивно (суперинфекция). В дальнейшем при суперинфицировании характер возникающих поражений соответствует стадии болезни в момент повторного заражения. Суперинфекция объясняется временным ослаблением или «срывом» инфекционного иммунитета. От суперинфекции необходимо отличать реинфекцию, т. е. новое, повторное заражение человека, ранее болевшего сифилисом (излечившегося) и, следовательно, утратившего инфекционный иммунитет. Описаны случаи даже трехкратного заболевания сифилисом. Инкубационный период у таких больных короче, чаще развиваются множественные язвенные шанкры с лимфаденитом, серологические реакции становятся положительными раньше. Во вторичном периоде папулы на коже нередко эрозируются. Это объясняется тем, что при сифилисе развивается реакция гиперчувствительности замедленного типа, после излечения в организме длительно сохраняются сенсибилизированные лимфоциты. Инфекционный иммунитет имеет нестерильный характер и обусловлен гуморальными факторами: в сыворотке больного обнаруживаются иммуноглобулины классов G, A и М.

Лабораторная диагностика. Для диагностики сифилиса оптимален комплексный подход, предполагающий одновременное использование нескольких методов. Их традиционно подразделяют на прямые, позволяющие доказать наличие возбудителя в исследуемом материале (заражение животных, различные виды микроскопии и молекулярно-генетические методы детекции ДНК T. pallidum – ПЦР и ДНК-зондирование), и непрямые – серологические тесты для выявления антител. В свою очередь, серологические тесты представлены нетрепонемными и трепонемными.

Исследуемым материалом для обнаружения трепонем в прямых методах является отделяемое твердого шанкра или его пунктат, пунктат лимфатического узла, соскоб из розеолы, ликвор. Лучше всего в нативном материале возбудитель выявляется темнопольной (см. рис. 111.4) или фазово-контрастной микроскопией, что позволяет наблюдать разные типы движения живого возбудителя. Если уже начато лечение антибиотиками, возбудителя в патологическом материале обнаружить невозможно. При необходимости проводят прямую (или непрямую) РИФ или окрашивают препарат по Романовскому – Гимзе. Эти методы используют только для ранней диагностики сифилиса.

Серологические тесты можно использовать на различных стадиях заболевания, кроме серонегативного первичного сифилиса. Обычно применяют комплекс серологических реакций. К нетрепонемным тестам с визуальным определением результатов относятся: реакция связывания комплемента (реакция Вассермана = РСКк = RW) с кардиолипиновым антигеном сердечной мышцы быка (перекрестно реагирующий антиген), реакция микропреципитации (МР, или РМП) – микрореакция с плазмой и инактивированной сывороткой; RPR – тест быстрых плазменных реагинов, и другие реакции. Специалисты считают, что для массового обследования лучше всего применять два теста: RPR и РПГА или ИФА, так как RPR более чувствителен при первичном сифилисе, РПГА – на более поздних стадиях заболевания, а ИФА – на всех стадиях. К нетрепонемным тестам с микроскопическим считыванием результатов относятся VDRL-тест и USR-тест. Нетрепонемные тесты используют в качестве отборочных (скрининговых), так как они могут давать ложноположительные результаты. В трепонемных тестах используют антигены трепонемного происхождения. Их применяют для подтверждения результатов нетрепонемных тестов (ложноположительны?) при клиническом, эпидемиологическом и анамнестическом подозрении на сифилис, для диагностики скрытых и поздних форм, для ретроспективного диагноза. К трепонемным тестам относят: РСКт (РСК с трепонемным антигеном), РИБТ (или РИТ) – реакция иммобилизации бледных трепонем, РИФ (одна из лучших реакций), РПГА, ИФА, иммуноблотинг.

Специфическая профилактика и лечение. Специфическая профилактика не разработана. Неспецифическая профилактика предусматривает воздержание от случайных половых связей, раннее выявление больных, особенно со скрытой формой заболевания, и их своевременное и эффективное лечение. Для лечения сифилиса используют антибиотики: пенициллин и его производные (водорастворимые и дюрантные формы), иногда эритромицин. Используют также препараты висмута, мышьяка, ртути.