Ифа анализ. Что такое иммуноферментный анализ
ИФА анализ — что это такое, расшифровка иммуноферментного анализа крови на паразитов, сифилис, ВИЧ, туберкулез. Норма в таблице, результаты
Благодаря развитию современной медицины, врачу при постановке диагноза больше не нужно ориентироваться на косвенные проявления заболеваний или проводить многоступенчатые лабораторные исследования. Достаточно провести один анализ, который подтвердит или опровергнет предполагаемый первоначальный диагноз.
Таким методом является иммуноферментный анализ (ИФА) — это исследование позволяет обнаружить специфические антитела и антигенны свойственные при разнообразных патологиях, что во многом ускоряет установку диагноза.
Что такое ИФА
ИФА анализ — это такое лабораторное исследование (метод), которое помогает определить присутствие или отсутствие определённых антител в организме для борьбы с вирусом и их количество.
Основой исследования является естественная реакция антиген (вредоносный организму объект) – антитело (белок уничтожающий вредоносные объекты), позволяющая выявить присутствие разнообразных вирусов, бактерий.
ИФА представляет собой естественный иммунный ответ организма – взаимодействие антитела с соответствующим антигеном. Так во время ИФА в пробирку с материалом добавляются поочередно антигены или антитела, после чего происходит выявление концентрации получившихся комплексов антиген-антитело.
Если совпадения образовались, то возникают иммунные комплексы, далее происходит ферментная реакция красящего вещества с объединённой молекулой. Именно благодаря изменению цвета в ходе ферментативной индикации происходит идентификация заболевания после исследования уровня определяемого соединения.
Виды иммуноглобулинов
Иммуноглобулины человека дифференцируются на несколько классов, отличающихся друг от друга свойствами, структурой и антигенными особенностями тяжелых цепей (Н-цепи). У всех млекопитающих, в том числе и человека, выделяют пять Н-цепей, которые и определяют принадлежность иммуноглобулинов к соответствующему классу: G, М, A, D, Е.
Каждый класс отличается друг от друга биологическими свойствами, и способностями связывать антигены, и скоростью и прочностью связи с молекулой.
Функции каждых иммуноглобулинов (lg) различны:
необходимы для иммунного ответа
способны связать 5 молекул антигена,
нужны для формирования раннего иммунитета
Образование местного иммунитета
Возникновение иммуноглобулинов происходит по своеобразной «цепочке» — lgM lgG, именно так реагирует организм на появление в организме антигена. Во время лабораторной диагностики проводится оценка концентрации трех основных иммуноглобулинов – G, M, A.
Показания к сдаче анализа на иммуноглобулины
ИФА-анализ с каждым годом становится все более популярным.
Такое исследование ускоряет постановку диагноза, а это очень важно для терапии таких патологий как:
- вирусный гепатит;
- ВИЧ-инфекция;
- цитомегаловирус,
- вирус Эпштейна-Барр,
- вирус герпеса,
- корь
- краснуха,
- туберкулез,
- сальмонеллёз,
- дизентерия,
- клещевой энцефалит,
- бактерии хеликобактер,
- боррелиоз,
- столбняк,
- сифилис,
- дифтерия,
- лептоспироз,
- хламидиоза,
- уреаплазмоз,
- микоплазмоз,
- коклюш.
Так же анализ позволяет определить инфицирование паразитами:
- плоскими червями
- аскаридами
- гистолическими амебами,
- печеночными тремадами,
- лямблиями,
- токсоплазмами,
- трихинеллами,
- двуусткой,
- цестодозами.
ИФА является своеобразным маркером аутоиммунных патологий и злокачественных новообразований.
Подготовка к сдаче анализа
При подготовке к исследованию следует придерживаться таких правил:
- за сутки до забора крови нельзя курить и употреблять алкоголь,
- не заниматься спортом или другими физическими нагрузками,
- стараться не допускать стрессов,
Перед тем как сдать ИФА анализ, нужно избегать стрессов.
Так же врачи рекомендуют придерживаться специальной диеты – исключить жирную и жареную пищу, а если исследование проводится на гепатиты, то необходимо не употреблять любые оранжевые овощи и особенно цитрусовые. Сдавать кровь следует с утра на голодный желудок.
Ложноположительным анализ бывает из-за невыполненных рекомендаций, особенно употребления жирной пищи, что приводит к слишком большой концентрации триглицеридов в плазме, из-за чего проводимость ИФА снижается.
Порядок взятия пробы
В качестве исследуемого материала может использоваться цельная кровь, сыворотка или плазма венозной крови. Забор материала, обычно проводится из локтевой вены, для этого применяется одноразовая игла и вакуумная пробирка, необходимо 5-10 мл крови.
Для точности результата важно придерживаться правильной техники взятия пробы – прокол самого сосуда и окружающих тканей должен быть произведен одной манипуляцией, поэтому используется короткая игла с большим диаметром, благодаря чему не травмируется противоположная стенка вены и не повреждаются эритроциты.
Так же для сохранения целостности эритроцитов, нужно чтобы кровь стекала по стенкам пробирки.
Во время хранения материала следует избегать возможной его ионизации, кроме того материал не должен контактировать с остатками дезинфицирующих средств, поэтому используется только одноразовая пластиковая пробирка, с маркировкой ФИО пациента, датой и временем сдачи материала.
Если необходимо непродолжительное хранение исследуемого материала, то используется холодильная камера с температурой 2-4 о С, если необходимо более продолжительное хранение, то материал замораживается при температуре -20 о С.
Как делают анализ
После подготовки исследуемого материала врач-лаборант приступает к необходимым манипуляциям. Для этого используются ряд специальных наборов антигенов, обдающих свойством спровоцировать ответные реакции организма на раздражитель, это разнообразные инфекции, гормоны, аллергены.
Схема ожидаемой реакции «антиген-антитело» выглядит приблизительно так:
- Первичная реакция — определяемый Ig (Ab) и очищенный антиген возбудителя (Ag).
- Для обнаружения получившихся иммунных комплексов далее следует новая иммунологическая реакция, где антигеном выступает связанный специфический Ig, а антителом для него выступает коньюгат- Ig (Ab).
- Последний этап — ферментативная реакция, вместе с катализатором молекулой коньюгата. Субстратом выступает хромоген (не окрашенный), который в процессе протекания реакции окрашивается, и интенсивность цвета и определяется количественный показатель иммуноглобулина в пробе.
В настоящий момент разработано множество разнообразных вариантов ИФА, четкая классификация их отсутствует. Обычно, методы рассматриваются исходя из разделения её на гетеро- и гомогенные — все фазы анализа происходят с применением твердой фазы или с использованием только раствора.
Современные клинико-диагностические лаборатории обычно используют гетерогенный (твердофазный) ИФА, в нем под твердой фазой подразумевается абсорбция антигенов или антител на твердой поверхности специальных лунок, расположенных на полистироловом микропланшете, метод подразделяется на прямой и непрямой ИФА.
При прямом ИФА, вносимый антиген закрепляет в период инкубационного процесса на поверхности пустых лунок, для этого исследуемые пробы материал помещают в чистые лунки на 20-25 минут, это нужно для прикрепления антигена к их поверхности. После этого происходит добавление необходимого антитела. Далее материал остается на определенное время для образования связей.
Антитела всегда добавляют в избытке, поэтому даже при их наличии в пробе остаются не связанные антигены, а если антигенов нет совсем, то связей не будет. Чтобы удалить«лишние» антитела проводится декантация, после чего остаются только те антитела, которые создали связь с антигеном.
После этого следует ферментативная реакции – добавление в лунки раствора с ферментом, после чего происходит окрашивание полученных связей.
При непрямом методе ИФА используемые антитела, заранее соединенные с субстратом ферментативной реакции; в этом случае связь антител с антигеном происходит в период инкубационного процесса, после чего происходит мобилизация связей на поверхности лунок, а вносимый после конъюгат и субстратно-хромогенный реагент окрашивают реакцию.
Таким образом, главным отличием непрямого от прямого метода является не приклеивание материала к поверхности чистых лунок, а связывание с антигеном, иммобилизованным на планшете.
Останавливается протекание реакции с применением специализированных устройств, далее каждая лунка подвергается процессу фотометрирования, за которым следует сравнительная характеристика полученного результата с проведенными ранее контрольными пробами.
Если обнаруживается повышение оптической плотности в пробе, то завышена и концентрация специфических антител в исследуемом результате.
Когда будет готов анализ
Проведение исследования не занимает много времени, от забора крови до получения результата проходит от 1 до 10 дней, в зависимости от диагностических мероприятий.
Результаты теста и их расшифровка
На полученном пациентом бланке-результате диагностики указывается отрицательный либо положительный результат на определенные классы иммуноглобулинов, так же указывается количественный показатель различных классов антител.
Возможны различные интерпретации результатов:
- IgM (+) (IgA, IgG не определялись) – процесс выздоровления;
- IgM (-) ;IgG (+), IgA (+) – хроническая инфекционная патология;
- IgM, IgG, IgA (все с – значением) – отсутствие защитных механизмов к инфекциям;
- IgG (+/-) и IgA (+/-), IgM (+) – острый процесс;
- IgM (-), IgA(-),IgG(+) – постинфекционный иммунитет;
- IgM, IgG, IgA (+) – хроническая патология в стадии обострения.
Так, например, если были обнаружены IgG и IgM, то возможно у пациента одно из таких заболеваний:
- вирусный гепатит;
- цитомегаловирус;
- герпес;
- ветряная оспа;
- хламидиозом;
- стафилококковая или стрептококковая инфекция.
Иммуноферментный анализ часто назначается при гормональных исследованиях, нормы показаны в таблице:
Что такое ИФА анализ крови и почему это важно для диагностики
ИФА анализ крови, что это такое? Наверное, все помнят, что в ответ на проникновение вирусов для борьбы с ними организм начинает вырабатывать комплексы антител. Эти иммунологические соединения обладают способностью распознавать и уничтожать «свой» возбудитель. На этом и построено исследование, которое позволяет определить наличие и количество иммуноферментов, свойственное для определенного заболевания.
Немного общих сведений об анализе
ИФА, или иммуноферментный анализ крови, дает возможность определить специфические антитела (иммуноглобулины) к определенному виду возбудителя. Метод ИФА основан на следующем:
- в ответ на внедрение микроорганизма иммунная система начинает вырабатывать антитела;
- иммунокомплексы отличаются специфичностью и уничтожают только чужеродные клетки;
- при добавлении в сыворотку крови больного экстракта возбудителей, если имеются антитела, образуется стандартное соединение: антитело-антиген, при этом происходит активное выделение ферментов.
О положительном или отрицательном тестировании в лаборатории судят по тому, произошла ли реакция в плазме после добавления к ней возбудителя, и насколько интенсивным был процесс.
Норма для здорового человека – это единичные иммунокомплексы или их отсутствие.
Анализ ИФА не указывает на какое-то определенное заболевание, он позволяет лишь предположить примерно тип возбудителя, вызвавшего появление иммунокомплексов и определить стадию воспалительного процесса. Это позволяет скорректировать дальнейшие методы диагностики.
Об иммуноглобулинах
Что такое иммуноглобулин, многим понятно: иммунный комплекс, образовавшийся в ответ на проникновение чужеродных клеток. Но какими они бывают?
ИФА метод позволяет выделить 5 разновидностей иммуноглобулинов:
Основными для диагностики считаются A, M и G (некоторые источники по диагностике указывают только три этих иммунных комплекса), поэтому стоит рассмотреть их особенности:
- А – отвечает за защиту слизистых. При острых патологиях он появляется в крови спустя 14 дней после инфицирования, а иногда и позже и исчезает через 8 недель от начала проявления признаков болезни. Если иммунокомплекс IgA сохраняется дольше, то можно предположить переход заболевания в хроническую форму. Антивирус А указывает на поражение слизистой мочевого пузыря, кишечника или органов дыхания.
- М – служит указателем острой фазы заболевания. Отмечается в плазме спустя 5 дней от момента проникновения инфекции (даже если нет выраженных признаков заболевания) и исчезает через 6 недель, если происходит разрешение острого процесса.
- G – остаточная реакция и иммунокомплексы сохраняются длительное время (иногда на протяжении всей жизни) и предотвращает повторное инфицирование или возникновение рецидивов. На формировании антител G основан принцип вакцинации, когда при введении ослабленных микробов и вирусов у человека вырабатывается длительный иммунитет. Повышение G – показатель того, что возбудитель повторно проник в организм или обострилась хроническая инфекция.
Иммуноферментный анализ крови на E и D не входит в обязательную программу обследования. Он назначается в следующих случаях:
- Е – когда предполагают, что патология вызвана паразитами;
- D – если есть вероятность, что патология имеет системный характер или возникла по причине возникшего иммунодефицита.
Анализ крови методом ИФА дает возможность обнаружить специфические антитела к чужеродным агентам уже на ранних стадиях патологии. В основе тестирования лежит стандартная реакция антиген-антитело, позволяющая определить наличие антител к возбудителю заболевания.
Показания для лабораторной диагностики
Анализ крови на иммуноферментный анализ показано проводить при подозрении на возникновение следующих патологий:
- онкология;
- вирусные гепатиты (при всех типах вируса);
- герпетические поражения слизистой или кожи;
- некоторые инфекционные процессы (сальмонеллез, корь, энцефалит, дизентерия);
сифилис; - инфекции, передающиеся половым путем (гонорея, хламидиоз, микоплазмоз и др.);
- атопические процессы (аллергии);
- цитомегаловирус;
- эндокринные сбои;
- иммунодефицит;
- бесплодие;
- глистные инвазии.
Также ИФА анализ крови позволяет спрогнозировать течение некоторых неинфекционных заболеваний:
- инфаркта;
- инсульта;
- неврологических расстройств;
- почечных патологий.
Также с профилактической целью проводят ИФА во время медосмотров.
ИФА диагностика позволяет выявить более 600 антител к инфекционным и неинфекционным антигенам, что делает исследование незаменимым при выявлении болезни на раннем этапе. Методика ИФА считается наиболее информативной при обследовании на ВИЧ и на онкологию.
На чем основана методика
Кажется, что иммуноглобулинов всего пять, а с их помощью определяется большое количество патологических процессов. Возможно ли такое?
Возможно. Это происходит потому, что подсчет иммуноглобулиновых соединений делается по разным тестам:
- антинуклеарные тела (указывают на аутоиммунные процессы);
- ревматоидный фактор (выявляет ревматические поражения);
- двуспиральные ДНК (выявляется группа белков, появляющихся при системных болезнях);
- ENA скрин (определяет несколько видов антигенов, свойственных при ревмофакторе или при системных соединительнотканных поражениях);
- антикардиолипиновые антитела (иммунокомплексы образуются при ВИЧ, эпилепсии и некоторых системных процессах);
- ANGA скрин (соединения характерны для аутоиммунных процессов);
- цитрулиновый пептид (антитела появляются при ревматоидном артрите);
- С-реактивный белок (С-реактивный протеин свидетельствует о наличие острого или обострении хронического процесса);
- иммунофлюоресцентный анализ (укажет на гормональный сбой или на наличие злокачественных новообразований).
Расшифровка анализа проводится с учетом применяемых методик. Оценка полученных данных довольно сложная и проводится врачом, а для пациентов, желающих перед посещением доктора самостоятельно проанализировать полученные из лаборатории данные, можно предложить следующую таблицу:
В таблице указаны лишь общие сведения. В анализе ИФА при расшифровке врачом учитывается не только наличие иммуноферментных соединений, но и их количество, а также методики, применяемые для проведения исследования.
Преимущества метода
ИФА анализатор довольно часто применяется при дифференциальной диагностике болезней и для контроля качества лечения. Методика имеет ряд преимуществ:
- Дешевизна. Диагностические наборы стоят относительно недорого.
- Простота. Нет необходимости в оснащении сложной аппаратурой, и исследование может быть проведено в любой лаборатории.
- Высокая информативность. Достоверность определения вида антигена около 90 %.
- Быстрота. Анализатор ИФА автоматизирован, в экстренной лаборатории данные исследования можно получить уже через несколько часов после сдачи биоматериала.
- Ранняя диагностика. Иммуноглобулины появляются в крови на начальной стадии заболевания.
- Длительность хранения. Взятый у пациента материал может сохраняться до года.
- Стадия болезни. Соотношение и основные характеристики обнаруженных в плазме иммуноглобулинов дают возможность определить тяжесть течения и стадию заболевания.
- Контроль динамики. При проведении лечения ИФА иммуноферментный анализ позволяет проводить коррекцию проводимой терапии в зависимости от лабораторных показателей.
- Легкость забора биоматериала. Для диагностики достаточно небольшого количества венозной крови.
Анализ крови ИФА высокоинформативен и позволяет выявить патологию на начальном этапе развития, но только на основании лабораторного исследования диагноз не ставится. Окончательная диагностика возможна лишь после полного обследования пациента.
Недостатки методики
Несмотря на ряд преимуществ, исследование крови методом иммуноферментации имеет некоторые недостатки:
- невозможность со 100% точностью определить вид возбудителя (при некоторых заболеваниях вырабатываются похожие иммуноглобулины);
- вероятность получения ложноположительного результата (бывает у беременных или при несоблюдении правил подготовки к анализу).
На достоверность диагностики может повлиять следующее:
- табакокурение и употребление спиртного;
- нервное перенапряжение или стресс;
- физические нагрузки;
- прием некоторых лекарств (кровь сдавать можно только спустя 10 дней после отмены препаратов).
Эти недостатки анализа крови на ИФА не мешают врачам признавать методику наиболее удобной и информативной для выявления болезней на ранних стадиях. При необходимости, для уточнения полученных из лаборатории данных, больным могут назначаться более специфические анализы, позволяющие вернее определить тип возбудителя.
ИФА в паразитологии
IgE свойственен глистным инвазиям, но может появляться в плазме и при некоторых аллергиях (находится в крови в небольшом количестве). Несмотря на вероятность получения ложноположительных реакций, кровь на ИФА часто назначается паразитологами для обнаружения следующих видов паразитов:
- гельминты;
- токсоплазма;
- амебы;
- трихинеллы;
- лямблии;
- простейшие;
- плоские черви.
Глистные инвазии, как и инфекционные возбудители, вызывают выработку антител Е. Рост в крови этого маркера почти всегда указывает на наличие в организме паразитов (при атопических реакциях он остается на прежнем уровне или незначительно повышается).
Паразиты не обязательно располагаются на слизистой кишечника, они могут проникать в ткани почек, сердца и других органов. Если паразитирование в кишечнике легко выявляется наличием в исследуемом кале яиц, личинок или взрослых особей, то поражение других тканей определяется только при помощи иммуноферментной реакции.
Теперь многим стало понятно, что такое ИФА и уже не пугает загадочное лабораторное сокращение. Действительно, исследование назначается не только для подтверждения заболеваний. Некоторые иммуноферментные тесты (сифилис, ВИЧ) входят в обязательную программу медицинского обследования, и получение отрицательного результата служит показателем здоровья. А если тестирование окажется положительным, то и это не повод для паники: чем раньше начнется лечение обнаруженной болезни, тем благоприятнее прогноз.
Как проводится и что показывает иммуноферментный анализ
Иммуноферментный анализ (ИФА) — метод лабораторной диагностики, позволяющий обнаруживать специфические антитела и антигены при самых разных патологиях.
ИФА — один из самых распространенных и точных методов для выявления инфекций, передающихся половым путем, в частности ВИЧ, ВПЧ, гепатита В.
Для того чтобы результаты анализов были максимально достоверными, необходимо правильно подготовиться к их сдаче.
Спецпредложения, скидки и акции помогут существенно сэкономить на медицинском обследовании.
Контроль качества лабораторных исследований, осуществляемый по международным стандартам, — дополнительная гарантия точности результатов анализов.
Современная диагностика в медицине немыслима без высокочувствительных лабораторных анализов. Прежде для установления причин тех или иных симптомов врачи были вынуждены ориентироваться на косвенные признаки болезни, а также проводить многоступенчатые микроскопические исследования в попытке обнаружить возбудителя инфекции. Сегодня достаточно одного-единственного теста — такого как иммуноферментный анализ — чтобы подтвердить или опровергнуть первоначальный диагноз.
Основные понятия и принцип метода иммуноферментного анализа
Иммуноферментный анализ (ИФА) — это метод лабораторной диагностики, основанный на реакции «антиген-антитело», который позволяет выявить вещества белковой природы (в том числе ферменты, вирусы, фрагменты бактерий и другие компоненты биологических жидкостей).
Чтобы понять, как устроен иммуноферментный анализ, попробуем разобраться в сути реакции «антиген-антитело». Антиген — это чужеродная для организма молекула, как правило, белкового происхождения, которая может попасть в тело человека вместе с инфекционным агентом. Частицы чужой крови (если она не совпадает с нашей по группе) также являются антигенами. В организме антигены способны вызывать иммунную реакцию, направленную на защиту целостности внутренней среды от чужеродных веществ. Поэтому наше тело синтезирует особые вещества — антитела (иммуноглобулины), способные по принципу «ключ к замку» соединяться с антигенами, связывая их в иммунный комплекс (этот процесс как раз называется реакцией «антиген-антитело»). Такие иммунные комплексы легче распознаются и уничтожаются клетками иммунитета.
Существует несколько разновидностей антител, каждая из которых вступает в действие на определенном этапе иммунного ответа. Так, первыми в ответ на проникновение антигена в организм синтезируются иммуноглобулины класса М (IgM). Содержание этих антител наиболее высоко в первые дни инфекционного процесса.
Следом за ними иммунная система выбрасывает в кровь иммуноглобулины класса G (IgG), которые помогают уничтожать антигены до полной победы над инфекцией, а также продолжают циркулировать по сосудам в дальнейшем, обеспечивая иммунитет к повторному заражению. На этом явлении основана вакцинация: благодаря прививкам, содержащим ослабленные антигены микробов и вирусов, в нашей крови появляется большое количество IgG, которые при контакте с реальной угрозой быстро подавляют инфекцию — до того, как она нанесет вред здоровью.
Также существуют иммуноглобулины класса А (они в большом количестве содержатся в слизистых оболочках, защищая «подступы» к организму), Е (борются с паразитарными инфекциями) и другие. В лабораторной диагностике объектами интереса чаще всего являются IgM, IgG и IgA: по их концентрации можно оценить, на какой стадии находится инфекционный процесс, а также узнать, болел ли когда-либо человек тем или иным недугом (например, краснухой или ветряной оспой).
Как узнать, какие именно антигены или антитела присутствуют в организме человека? Когда врач предполагает, что причиной заболевания является определенная инфекция, или желает измерить концентрацию определенного гормона, он назначает пациенту иммуноферментный анализ.
Реакцию «антиген-антитело» можно воспроизвести в лабораторных условиях: использовать уже готовые антитела или антигены, чтобы определить, есть ли в исследуемом образце соответствующее им соединение.
Для начала необходимо получить образец биологической жидкости — обычно, это сыворотка крови. Лаборатория использует пластиковые планшеты с лунками, в которых уже содержатся очищенные антигены предполагаемого возбудителя (или — антитела, в случае если задачей является поиск антигена). Образцы вносятся в лунки, где происходит — или не происходит — образование иммунных комплексов. Если «встреча» состоялась, особое красящее вещество вступает в ферментную реакцию с объединенной молекулой, что позволяет с помощью инструментальной оценки оптической плотности сделать выводе о результатах анализа.
ИФА бывает качественным и количественным. В первом случае подразумевается однозначный ответ: искомое вещество или найдено, или не найдено в образце. В случае с количественным анализом более сложная цепь реакций дает возможность оценить концентрацию антител в крови человека, что в сравнении с результатами предыдущих тестов даст ответ на вопрос о том, как развивается инфекционный процесс.
Преимущества метода
Бесспорные преимущества ИФА — высокая чувствительность и специфичность метода. Чувствительность — это возможность распознать искомое вещество, даже если его концентрация в образце невысока. Специфичность же подразумевает безошибочность диагностики: если результат положительный, значит, найдены именно те антитело или антиген, которые предполагались, а не какие-то другие.
ИФА во многом заменил «золотой стандарт» микробиологии — бактериологический метод диагностики, в ходе которого для идентификации возбудителя требовалось выделить его из организма, а затем в течение нескольких дней выращивать культуру на питательной среде в пробирке. Все то время, пока производился анализ, врачи были вынуждены лечить пациента «вслепую», догадываясь о происхождении микроорганизма по симптомам болезни. Определение IgM с помощью ИФА позволяет поставить точный диагноз уже в первые дни болезни.
Высокая степень технологичности проведения иммуноферментного анализа минимизирует влияние человеческого фактора, что снижает вероятность ошибки. Большинство используемых в современных лабораториях тест-систем и реактивов для ИФА выпускаются в промышленных условиях, что гарантирует точный результат.
Недостатки метода
К сожалению, для проведения ИФА нужно знать, что именно искать: методика анализа подразумевает, что врач заранее имеет предположение о природе заболевания. Поэтому нет смысла назначать такой тест в надежде случайно «угадать» диагноз.
В случае диагностики инфекционных заболеваний иммуноферментный анализ не может найти возбудителя и определить его специфичные свойства: он лишь указывает на наличие антител в крови у больного, косвенно свидетельствующих о присутствии чужеродного микроорганизма в теле человека.
ИФА — крайне точный, но не дешевый метод, поэтому обращаться к нему нужно с умом, а интерпретацией результатов должен заниматься квалифицированный врач.
Показания к назначению и выявляемые заболевания
Невозможно охватить полный список показаний к проведению ИФА. Вот наиболее распространенные цели анализа:
- Диагностика острых и хронических инфекционных заболеваний:
- IgM и IgG к вирусным гепатитам А, B, C, E, а также антигенов гепатитов В и С;
- IgG к ВИЧ;
- Ig M и IgG к цитомегаловирусной инфекции;
- Ig M и IgG к вирусу Эпштейна-Барр;
- Ig M и IgG к герпетическим инфекциям;
- Ig M и IgG к токсоплазмозу;
- Ig M и IgG к кори, краснухе, сальмонеллезу, дизентерии, клещевому энцефалиту и другим заболеваниям;
- IgG к паразитарным заболеваниям;
- Ig M и IgG к инфекциям, передающимся половым путем;
- IgG к хеликобактерной инфекции.
- Общая оценка показателей иммунитета человека и маркёров некоторых аутоиммунных заболеваний.
- Выявление онкологических маркёров (фактора некроза опухоли, простатспецифического антигена, раково-эмбрионального антигена и других).
- Определение содержания гормонов в сыворотке крови (прогестерона, пролактина, тестостерона, тиреотропного гормона и других).
Анализируемый биоматериал и особенности его забора
Основной биоматериал для проведения ИФА — это сыворотка крови: в лаборатории у пациента берут образец крови из вены, из которого в дальнейшем удаляют форменные элементы, затрудняющие проведение анализа. В некоторых других случаях для анализа используется спинномозговая жидкость, околоплодные воды, мазки слизистых оболочек и т.д.
Для того чтобы избежать искажений в результатах, рекомендуется сдавать кровь натощак, а за две недели до исследования (если целью является диагностика хронических, скрыто протекающих инфекционных заболеваний) необходимо отказаться от приема антибиотиков и противовирусных препаратов.
Сроки готовности результатов ИФА
При наличии необходимых реактивов и хорошей организации работы лаборатории результат анализа вы получите в течение 1–2 суток после забора крови. В некоторых случаях, при необходимости получения экстренного ответа, этот срок может быть сокращен до 2–3 часов.
Расшифровка иммуноферментного анализа
Результатом качественного ИФА будет однозначный вердикт: искомое вещество либо найдено, либо не найдено в образце. Если же речь о количественном анализе, то концентрация может выражаться числовым значением или определенным количеством знаков «+» (от одного до нескольких).
Анализируемые показатели
- IgM — наличие этого класса иммуноглобулинов говорит об остром инфекционном процессе в организме. Отсутствие IgM может говорить как об отсутствии конкретного возбудителя в организме, так и о переходе инфекции в хроническую стадию.
- IgA при отрицательном результате теста на IgM чаще всего свидетельствует о хронической или скрыто протекающей инфекции.
- IgM и IgA (совместное присутствие) — два положительных результата говорят о разгаре острой фазы заболевания.
- IgG говорит либо о хронизации заболевания либо о выздоровлении и выработке иммунитета к инфекционному агенту.
Возможные результаты ИФА
В зависимости от содержания анализа в бланке могут быть представлены данные в виде таблицы с перечислением всех антител или антигенов с пометками об отрицательной или положительной реакции, либо будет указано количественное значение результата (отрицательный, слабоположительный, положительный или резко положительный). Последний вариант определяет, сколько антител содержится в анализируемом образце.
Еще один количественный показатель — индекс авидности антител, выраженный в процентах. Он указывает, сколько времени прошло от начала инфекционного процесса (чем выше индекс — тем больше).
Сегодня выпускаются тысячи видов тест-систем ИФА, позволяющих обнаруживать специфические антитела и антигены при самых разных патологиях. Поэтому этот анализ используется практически во всех медицинских отраслях. Диагноз, поставленный с помощью ИФА, — это гарантия назначения адекватной терапии и эффективного лечения заболевания.
Где можно сдать биоматериала на иммуноферментный анализ?
Информативность ИФА делает этот анализ важным инструментом в работе многих медицинских центров. Но можно ли доверять такую диагностику государственным лабораториям или лучше самим выбрать, где провести такое исследование?
«Хронические инфекции — большая проблема современной медицины. Когда по разным причинам не удается вовремя поставить диагноз, болезнь переходит в вялотекующую стадию и постепенно подтачивает организм, — рассказывает специалист сети независимых лабораторий «ИНВИТРО». — В поликлиниках и стационарах, работающих в рамках общественной системы здравоохранения, не всегда есть ресурсы для целенаправленного поиска таких инфекций, поэтому бывает, что врачи предоставляют разбираться с проблемой самостоятельно. Но не стоит обращаться в первую попавшуюся частную лабораторию, конечно, если вам не нужен сомнительный результат, который никак не поможет в диагностике. Только те медицинские центры, которые работают в соответствии с международными стандартами качества, могут провести ИФА по всем правилам, избежав ошибок и искажений в процессе анализа. Так, наша лаборатория «ИНВИТРО» одной из первых предложила пациентам проведение ИФА в частном порядке, и за минувшие двадцать лет мы завоевали безупречную репутацию и помогли сотням тысяч человек».
Что такое иммуноферментный анализ?
С прогрессом современной медицины удается проводить более углубленную диагностику при подозрении на те или иные патологии у пациента. Одним из информативных методов лабораторного исследования стал ИФА анализ, который проводят методом забора венозной крови. То есть для пациента ничего в целом не меняется. А вот лаборант-анализатор ИФА проводит сложную технику исследования забранного биоматериала. В том, что такое анализы ИФА и, каковы тонкости применения ИФА метода в качестве диагностического, разбираемся в материале ниже.
Что такое иммуноферментный анализ?
Иммуноферментный анализ крови — это один из способов лабораторной диагностики, который основан исключительно на реакции под названием «антиген-антитело». Здесь стоит уяснить, что антиген — это чужеродное белковое соединение (молекула), попавшее в организм человека с паразитарной, вирусной или другой инфекцией. То есть, попросту вредитель. В свою очередь антитело — это иммунная клетка (иммуноглобулин), встающая на защиту организма человека при обнаружении в нем чужеродных молекул.
Выработку антител провоцируют сами же антигены, проникшие в организм человека. При вступлении в «битву» за здоровье организма антитела как бы помечают собой антигены, что при исследовании крови и видит лаборант. То есть в забранном биоматериале можно отследить не только наличие инфекции, но и ее следы уже после того, как организм полностью выздоровел.
При проведении анализа на ИФА лаборант может видеть такие иммуноглобулины к антигенам:
- Иммуноглобулины М (в результатах значатся как IgM). Свидетельствуют о том, что инфекционный процесс в организме только набирает свою силу. То есть инфицирование произошло совсем недавно;
- Иммуноглобулины G (значатся как IgG). Способствуют уничтожению антигенов через несколько дней после внедрения инфекции в организм человека. Иммуноглобулины G могут находиться в организме пациента достаточно долго, формируя иммунитет к определенному вирусу;
- Иммуноглобулины Е (значатся как IgЕ). Свидетельствуют о паразитарных инфекциях в организме. Он же говорит и об атопических реакциях при аллергии. При этом стоит знать, что проведение анализа ИФА дает результат с точностью 90% на паразитарные инфекции;
- Иммуноглобулины А (значатся как IgА). Максимально выступают на защиту слизистых оболочек пациента.
Таким образом, назначая иммуноферментный анализ крови пациенту, лечащий врач может отследить давность инфекции, степень ее прогрессирования или выявить наличие иммунитета к той или иной инфекции.
Процесс ИФА диагностики выглядит таким образом:
- Забранная венозная кровь приводится в лаборатории в состояние сыворотки крови;
- Затем лаборант использует специальный лоток с ячейками, в каждой из которых уже имеются все необходимые антигены. Достаточно просто капнуть в каждую ячейку сыворотку крови и отследить реакцию иммуноглобулинов (антител) на антигены. О наличии «нужной» реакции свидетельствует изменение цвета исследуемого материала. В дальнейшем лаборант изучает оптическую плотность исследуемой среды.
В целом иммуноферментный анализ на паразитов помогает выявить такие паразитарные патологии:
- Аскаридоз и энтеробиоз (аскариды и острицы);
- Трихинеллез;
- Описторхоз в острой и хронической формах;
- Лямблиоз;
- Амебиоз;
- Токсоплазмоз;
- Лейшманиоз в любой форме.
Важно: иммуноферментный анализ бывает как качественным, так и количественным. В первом случае лаборант лишь подтверждает или опровергает наличие искомого вещества в крови. Во втором случае в результате анализа указывают его концентрацию в организме пациента.
Недостатки метода
При всех достоинствах такого способа диагностики стоит понимать, что иммуноферментный анализ крови — не способ нахождения причины болезни пациента, а лишь метод подтверждения предполагаемого лечащим врачом диагноза. А ввиду того, что исследование является достаточно недешевым, использовать его нужно с умом. При этом результаты исследования должен трактовать только квалифицированный специалист.
Подготовка к анализу на паразитов
Важно понимать, что выявление паразитов через анализ крови требует определенной подготовки от пациента. Так, перед сдачей крови необходимо сделать следующее:
- За сутки до забора биоматериала нужно исключить из рациона жирную пищу, алкоголь и копчености;
- Кровь на иммуноферментный анализ крови на паразитов и другие инфекции следует сдавать с утра натощак;
- Перед сдачей крови запрещено курить минимум за 3-4 часа;
- В день забора крови желательно не нервничать и не прибегать к усиленным физическим нагрузкам.
Соблюдение этих правил позволит избежать ложноположительного результата на антитела к паразитам.
Расшифровка результатов
После того как мы разобрали аббревиатуру ИФА и что это такое ─ выяснили, стоит перейти к трактовке результатов. Здесь важно понимать, что если анализ проводили качественный, то результат будет лишь положительным или отрицательным. То есть диагностика либо подтверждает подозрения доктора относительно определенного диагноза, либо опровергает их. В этом случае в бланке будут стоять символы «+» или «-» соответственно.
Важно: отрицательный результат анализа не всегда свидетельствует об отсутствии инфекции. Дело в том, что антитела к антигенам могут формироваться в течение 14 дней после инфицирования и вполне вероятно, что они еще не сформированы.
В случае же если проводится количественный анализ, то здесь определяется вид антител, их количество и стадия активности. В частности при такой диагностике определяют антитела (иммуноглобулины) IgG и IgM, которые формируются в разные периоды прогрессирования инфекции. Самыми распространенными вариантами результатов в этом случае являются:
- Повышенный IgМ и полное отсутствие IgG. Такая картина свидетельствует о недавнем инфицировании и острой фазе течения патологии.
- Повышенная активность иммуноглобулинов обоих видов (IgМ и IgG). Говорит о давнем и хроническом протекании инфекционного процесса.
- Активность IgG и полное отсутствие IgМ. Инфицирование было не менее полугода назад и сейчас вирус пребывает в затяжной хронической стадии.
- Отсутствие антител IgG и IgA. Результат не определен.
- Отсутствие антител IgM, IgA и IgG. Свидетельствует об отсутствии иммунитета к определенной инфекции.
- Активность антител IgG, IgM и IgA говорит об обострении хронического процесса.
Помимо выявления типов антител лаборант в специальной графе бланка указывает и их количество на объем крови. Помните, разобравшись в том, что такое метод ИФА, не трактуйте результаты самостоятельно. Полученные результаты с точностью может интерпретировать только лечащий врач в зависимости от предполагаемого диагноза, выстраиваемого на основании клинической картины у пациента.